睾丸的功能主要有两个，一个是分泌雄激素的功能，另一个是产生精子的功能。睾丸产生的雄激素可以启动第二性征的发育、维持男性特征，比如促进阴茎的发育、喉结的长大、声音变得低沉、肌肉变得强壮。另外也是维持男性勃起功能的一个重要的激素，而产生精子的功能主要用于男性的生育能力，如果睾丸的生精功能出现了问题，就可能会出现男性不育症。
睾丸是男性所特有的生殖器官，正常是位于阴囊内。因为阴囊的温度比腹腔温度要低1-2℃，所以睾丸要在稍低一点的温度才能够保持正常的功能。而睾丸位于体内，比如腹腔、盆腔，就会影响睾丸的生精功能，这种称为隐睾。